如何使用snpEff创建本地数据库

snpEff的使用是在Linux系统中Java运行环境下。

一、下载snpEff

方法一:

直接在家目录下载使用命令

wget http://sourceforge.net/projects/snpeff/files/snpEff_latest_core.zip

解压命令:

unzip snpEff_latest_core.zip

二、查看snpEff是否存在需要的数据库

1、snpEff_latest_core.zip解压后会产生一个名为snpEff的文件夹(或者叫目录),在该目录下输入以下命令,便可查看snpEff中的数据库:

java -jar snpEff.jar databases > snpEff.databases.list.txt

grep -i Zea_mays snpEff.databases.list.txt

2、如果数据库存在,则会显出来,同时显示的还有数据库下载的网址。

3、没有的话,准备建立本地数据库。

三、建立数据存储目录

1、在snpEff建立data目录

cd snpEff

mkdir data

2、在data目录下建立genomes和Zea_mays.AGPv2(数据库名)目录

mkdir genomes

mkdir Zea_mays.AGPv2

四、配置自己的基因组和注释文件

准备三个数据(以本人数据为例,参考基因组为玉米B73的v2版本)

基因组序列信息(fasta文件):Zea_mays.AGPv2.17.dna.toplevel.fa,简写为Zea_mays.AGPv2.fa,放入genomes目录下;

序列注释文件(gtf或gff3):Zea_mays.AGPv2.17.gtf ,简写为genes.gtf,放入Zea_mays.AGPv2目录下;

GWAS群体的基因型信息(vcf文件):221.recode.vcf 放入data目录下。

此处很重要!!!

五、更改配置文件snpEff.config

编译后,点击“ESC”退出编辑模式,输入“:wq”保存并退出。

2、数据库建立

在snpEff目录下输入命令:java -jar snpEff.jar build -gtf22 -v Zea_mays.AGPv2

如果是gtf3文件,命令为:java -jar snpEff.jar build -gff3 -v Zea_mays.AGPv2

如果成功那么在Zea_mays.AGPv2目录下会有一个".bin"文件产生。

六、对vcf格式文件进行注释

1、在data目录下命令如下:

java -Xmx16g -jar ../snpEff/snpEff.jar eff -v Zea_mays.AGPv2 -c ../snpEff/snpEff.config -i vcf 221.recode.vcf > 221.snp.vcf

2、命令代码解析:(参考出处> http://blog.sina.com.cn/s/blog_ab3eddb50102vzm6.html)

-Xmx16g: 指定内存16G

-jar: 指找到snpEff.jar的路径

eff -v: 指明物种名

-c: 指找到snpEff.config的路径

-i vcf: 指明文件格式及其文件

> 221.snp.vcf : 输出文件的名字及文件格式

3、成功后,在data目录下会产生两个文件:

snpEff_summary.html

221.snp.vcf

snpEff_summary.html在网页中查看

221.snp.vcf中Notepad++中查看

七、几点感悟

1、先说明非常重要一点:建立本地数据库太麻烦了,以上几个步骤,成功走下来不是一两天就可以的,各种BUG!

2、非常感谢小谢师兄的无私帮助和耐心指导,不然对于我这样的生信小白早就卡死在入门的门槛上。

3、感谢那些愿意写下总结并发送上网的人儿,根据他们的文章我一遍遍的修改错误,这也是我写此篇总结的初衷,希望也可以给别人带去微小的帮助。

4、感谢自己的不放弃,冒着“猝死”的生命危险,凌晨三点钟仍在一遍一遍的修改代码,思考问题出在哪里。

奋斗吧,骚年们!

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