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SnapGene简单入手(三)
“SnapGene是构建质粒的利器。” 前面介绍了利用双酶切方法将目的基因连接到EGFP质粒中构建荧光质粒。但是双酶切方法有很多局限性，例如目的...
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菜鸟学习之旅(一)——无缝克隆(上)
最近开始了分子生物学中质粒设计和构建实验，其中设计到无缝连接克隆，正好借着这个机会温故和知新，一只小菜鸟的学习之旅开始了。 一. 最最最基...
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菜鸟学习之旅(一)——无缝克隆(中)上一部分中介绍了最最基础的PCR反应和传统分子克隆，包括内切酶，连接酶，外切酶，PCR扩增，转化等等是之后所有分子克隆的基础。如果说限制性内切酶...
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SnapGene简单入手（二）
按照实验需求，质粒构建分为克隆质粒，表达质粒，基因敲除质粒，报告质粒，病毒质粒，基因组工程质粒等。 这部分以pEGF-N1为backb...
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如何快速了解新接触的质粒(七)
“会读质粒图谱才能用好质粒。” 前面各个部分分别介绍了质粒的分类，复制起点，启动子，抗性以及蛋白纯化和鉴定标签，这部分将介绍蛋白标签的另一个常用...
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SnapGene简单入手(一)
“SnapGene是模拟质粒构建的利器。” SnapGene是一款功能强大的多功能的分子生物学工具，能够非常直观的注释分析和DNA图谱，用于创建...
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如何快速了解新接触的质粒(一)
质粒(plasmids)是常用的一种载体(Vecto)，是做分子相关领域永远无法躲避的一道难题，不管做分子克隆，蛋白表达，包装病毒等等都需要用到...
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菜鸟学习之旅(一)——无缝克隆(下)
这一部分我们就以人p53CDS区为目的基因片段和pUC19为载体为例，讲解一下无缝克隆的具体操作流程。 一. 查找p53目的基因 1. 在N...
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如何快速了解接触的质粒(四)
“会读质粒图才能用好质粒。” 前面部分稍微复杂一点的启动子和复制子已经大概介绍完了，后面会慢慢补充遗漏的小知识点，这一part是相对简单但是对于...